光纖探頭的制作與修飾

將11cm長的石英光纖去除約6.5c m的涂覆層，然后將其放入30% HF中腐蝕適當時間，得到所
需錐角度(定義為腐蝕后纖芯的直徑與未被腐蝕纖芯的直徑之比，即d2/d,，參見圖1)的組合型探頭，錐型部分的長度約為0.5 c m,配制pira ha溶液(濃H2SO4:H2 二3:1)，將探頭浸人其中30m in;然后放人超聲波清洗儀中洗滌，并用超純水進行充分清洗，直到清洗液的pH值為中性，最后在室溫下用氮氣吹干，保存于真空干燥箱中備用。為進行免疫分析，須將抗體或抗原固定到探頭表面上。

按照文獻的方法，先將探頭硅烷化，將潔凈的探頭放人含2%M TS甲苯溶液中反應2h。用甲苯溶液清洗3次，然后放人0.02 m ol/LGMBS乙醇溶液中，反應1h后用乙醇沖洗3次，再用PBS沖洗干凈。最后，將硅烷化好的探頭放人0.05留L大鼠IgG中反應2h，用PBS沖洗后，在4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/FONT>

熒光染料溶液的配制
準確稱取 0.5 m g的Cy5.5 染料，用50A LD MSO溶解，配制成10g /LC y5.5 溶液，然后用PBS緩沖液配制成10 x 10-7 mo1VL原液。實驗時按要求對原液進行稀釋，配制不同濃度的C盧.5溶液。